Mouse CCL5 / RANTES enzyme-linked immunoassay kit
Catalog# EM0032
Mouse CCL5 / RANTES enzyme-linked immunoassay kit
Application
-
ELISA
Reactivity
-
Mouse
Standard curve range
-
6.86~5000 pg/ml
概述
产品名称
Mouse CCL5 / RANTES enzyme-linked immunoassay kit
产品类型
Elisa Kit
灵敏度
1.86 pg/ml (10 μl)
| pg/ml | O.D. | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0.00 | 0.0109 | 0.0120 | 0.0115 | |
| 6.86 | 0.0222 | 0.0229 | 0.0226 | 0.0111 |
| 20.58 | 0.0490 | 0.0479 | 0.0485 | 0.0370 |
| 61.73 | 0.1153 | 0.1077 | 0.1115 | 0.1001 |
| 185.19 | 0.3341 | 0.3222 | 0.3282 | 0.3167 |
| 555.56 | 1.0620 | 1.0130 | 1.0375 | 1.0261 |
| 1666.67 | 2.8860 | 2.8410 | 2.8635 | 2.8521 |
| 5000.00 | 4.3489 | 4.3304 | 4.3397 | 4.3282 |
精度
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
| Sample Number | S1 | S2 | S3 | S1 | S2 | S3 |
| 22 | 22 | 22 | 6 | 6 | 6 | |
| Average(pg/ml) | 111.7 | 647.3 | 1815.5 | 107.4 | 516.0 | 1760.2 |
| Standard Deviation | 7.4 | 43.1 | 130.2 | 6.6 | 25.8 | 86.3 |
| Coefficient of Variation (%) | 6.6 | 6.7 | 7.2 | 6.1 | 5.0 | 4.9 |
板内精密度：3 个已知浓度的样本酶标板内重复测定 20 次，评估酶标板内的精密度。
板间精密度：3 个已知浓度的样本酶标板间重复检测 6 次，评估酶标板间的精密度。
加标回收
健康小鼠血清加入 3 个不同浓度水平的小鼠CCL5，未加小鼠 CCL5 的血清作为本底，计算回收率。回收率的范围从 99 % 至 125 %，平均回收率为 116 %。
样本值
| Sample Matrix | Sample Evaluated | Range (pg/ml) | Detectable (%) | Mean of Detectable (pg/ml) |
|---|---|---|---|---|
| Serum | 30 | 15.09-64.56 | 100 | 37.12 |
应用本试剂盒，检测 30 个健康小鼠的血清样本，小鼠的用药史不详。
n.d. = 测不到浓度值。样本的浓度值低于灵敏度被认为测不到浓度值。
实验类型
Sandwich Elisa
种属反应性
Mouse
检测方法
Colorimetric
操作时长
120min
标准曲线梯度
7点/3倍
孵育次数
2
加样体积
10 μl
产品特性
储存条件
存储于 2-8 ℃
靶点
UNIPROT
功能
RANTES（激活时调节，正常T细胞表达和可能分泌），也称为CCL5，是趋化因子“CC”亚家族的成员。它通过化学吸引白细胞和调节其功能的能力在炎症免疫反应中起主要作用。RANTES 的 cDNA 最初是通过减法杂交作为 T 细胞特异性序列发现的。人类 RANTES cDNA 将高度碱性的 91 个氨基酸 （aa） 残基前体多肽与 23 aa 疏水信号肽编码，该信号肽被切割以生成 68 aa 成熟蛋白。在推断的aa水平上，人类RANTES与小鼠RANTES表现出约85%的同源性。
RANTES 是一种有效的化学引诱剂，适用于多种不同细胞类型，包括未刺激的 CD4+/CD45RO+ 记忆 T 细胞和具有幼稚和记忆表型的受刺激 CD4+ 和 CD8+ T 细胞、NK 细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞、单核细胞和小胶质细胞。除了对迁移的影响外，RANTES还可以激活多种细胞类型，包括T细胞，单核细胞，中性粒细胞，NK细胞，树突状细胞和星形胶质细胞。T细胞活化通常需要相对较高的RANTES浓度（~1μM），并且依赖于分子的聚集以及与细胞表面糖胺聚糖（GAGs）的结合。这种活性是否在体内发生尚不清楚，尽管在小鼠中，与野生型对照相比，腹膜内注射的RANTES突变体无法聚集和/或结合GAG，不能吸引白细胞。其他体内研究表明，RANTES敲除小鼠表现出白细胞募集不足到急性炎症部位。
RANTES，已知与四种已鉴定的七种跨膜G蛋白偶联受体相互作用：CCR1，CCR3，CCR4和CCR5（22-25）。RANTES刺激可以启动各种依赖于细胞环境的信号级联。例如，在T细胞中，RANTES可以刺激细胞内Ca2+的升高，并激活粘附激酶（FAK），蛋白激酶A，PI3激酶，Rho GTP酶和JAK / STAT信号通路。巨细胞病毒蛋白US28与CC趋化因子受体表现出显着的同源性，并且能够结合RANTES。膜跨越US28可以根据上下文以组成方式发出信号，结合RANTES并启动G蛋白介导的信号级联反应，或隔离RANTES并潜在地改变炎症反应。
RANTES受体CCR5也是HIV-1的R5（M-tropic）变体的主要共受体。已经证明，RANTES以及其他CCR5配体，巨噬细胞炎症蛋白（MIP）-1α和MIP-1β可以竞争性地抑制CCR5 / HIV-1相互作用并在体外抑制病毒感染。这些效应显然不需要来自CCR5受体的完全完整的信号传导。因此，阻断HIV-1与CCR5相互作用的RANTES和非肽化合物的修饰形式显示出未来治疗的希望。相比之下，一些报告表明，RANTES可以增强使用CXCR4而不是CCR5的HIV-1的X4（T-tropic）变体的体外复制。这种活性通常需要相对较高的RANTES浓度（~μM），并且取决于与细胞表面GAG的相互作用，寡聚化以及酪氨酸激酶和MAP激酶信号级联的激活。