华安生物提供两种不同类型的ELISA试剂盒，满足您的多样需求

Quality ELISA 试剂盒

包含检测该蛋白靶点的所有成分。（不同试剂盒略有不同，一般包含检测抗体、重组标准品、与辣根过氧化物酶偶联的链霉亲和素、抗体包被的96孔微孔板、封板膜、显色液、终止溶液、包板缓冲液（PBS）、洗涤缓冲液等）

DTSet辅助试剂盒：

包含捕获抗体、检测抗体、重组标准品、与辣根过氧化物酶偶联的链霉亲和素 （Streptavidin-HRP）

其他可以单独购买：

96孔微孔板、封板膜、显色液、终止溶液、包板缓冲液（PBS）、洗涤缓冲液和检测缓冲液。

华安生物试剂盒在收到后可在2-8 ℃下保存 6 个月。

ELISA 试剂盒的灵敏度通常以最低检测浓度（Limit of Detection, LOD）或最低定量浓度（Limit of Quantification, LOQ）表示，是指在统计学意义上能够显著区别于空白背景的最低分析物浓度。该数值可通过多次重复测定空白样本和低浓度标准品，并基于其信号值与标准偏差进行计算得出。具体灵敏度数据可在该试剂盒的产品说明书或官方网站的详细参数表中查询。不同试剂盒因抗体亲和性、酶标记效率及检测系统等因素会具有不同的灵敏度性能。

若实验中观察到标准品显色极弱或无法显色，可能涉及多个环节的问题，包括但不限于：

试剂储存条件不当：如酶标记物或底物溶液未避光保存或反复冻融，导致活性下降；

孵育时间或温度不足：未能严格按照说明书要求进行孵育；

抗体效价降低：捕获抗体或检测抗体可能因保存不当或反复使用而活性下降；

洗涤步骤不充分：残留物质干扰结合反应；

标准品配制错误：稀释液选择不当或梯度稀释操作有误。

建议系统检查实验流程，确认每步操作与试剂盒要求一致。如无法确定原因，请联系我们的技术支持团队并提供详细实验记录，以便进一步分析。

高背景通常源于非特异性结合或污染，主要包括：

洗涤不充分：未能彻底去除未结合的抗体或酶标记物，应确保洗涤液充分析出并充分拍干；

试剂污染或交叉污染：如移液器、槽板或试剂受到微生物或先前实验物质的污染；

样本基质效应：血清、血浆或细胞培养液中存在内源性酶或嗜异性抗体；

封闭不充分：封闭液浓度或孵育时间不足，未能有效覆盖非特异性结合位点；

抗体浓度过高：尤其是检测抗体使用量超出推荐范围。

优化洗涤程序、确保试剂洁净、适当稀释样本或重新优化封闭条件可有助于降低背景。

我们强烈建议使用新鲜制备的样本进行检测，以避免降解或变性。如必须保存，请遵循以下原则：

短期保存：置于 4°C 冷藏，建议在3天内使用；

长期保存：分装后存于 –20°C 或 –80°C，避免反复冻融（一般不超过3次冻融循环）；

注意样本类型差异：某些细胞因子或磷酸化蛋白易降解，需添加蛋白酶抑制剂并优先选择 –80°C 保存。

具体样本类型的保存要求请参见试剂盒说明书中的相关建议。

为保障实验结果的可靠性与重复性，我们推荐：

设置复孔：每个样本或标准品至少应设2个复孔（一式两份），一式三份可进一步提高数据可靠性；

设立质控：包括空白孔、阴性对照和阳性对照；

规范曲线拟合：使用合适的数学模型（如四参数 logistic 回归）拟合标准曲线，并确保R² > 0.99；

数据校验：计算复孔间变异系数（CV），通常要求CV < 10%。

此外，建议在正式实验前进行预实验以确定样本最佳稀释倍数。