多重免疫荧光染色试剂盒-三标四色（多重荧光免疫组化法）IRISKit® HyperView mTSA Kit

产品名称

多重免疫荧光染色试剂盒-三标四色（多重荧光免疫组化法）IRISKit® HyperView mTSA Kit

包装规格

预期用途

用于实现在同一组织切片上多个靶标蛋白共同染色，从而通过荧光图像分析挖掘组织微环境中的复杂信息，如定量分析、共表达确定细胞分型、空间关系分析等。

反应原理

首先一抗识别目标蛋白抗原表位，继而带有HRP的二抗与一抗结合，加入携带非活性酪胺底物的荧光基团，该荧光基团在HRP和过氧化氢的催化作用下被激活，从而识别目标蛋白上的酪氨酸残基并与之紧密结合，因此在目标蛋白上产生了高密度的共价结合的酪胺标记。在染色完成后，去除非共价结合抗体，再进行下一个抗体染色。该方法不受抗体种属的限制，只需要每轮染色更换不同的酪胺荧光基团来标记不同的抗原，从而实现多重荧光免疫染色。

存储条件及有效期

4℃保存，有效期6个月。启用后注意保存，切勿污染。若荧光染料的颜色发生变化，即表示失效。

注意事项

1.对于抗体、显色试剂，先使用低速离心机短时间混匀后取用。

2.请提前准备一次性5mL无菌注射器、0.22μm的有机系过滤器备用。

3.请在拿到试剂盒后，及时取出[6-1]、[6-2]、[6-3]，根据实验用量所需进行分装，放置于-20℃冰箱冷冻保存。日常使用时请提前取出，恢复至室温后正常使用，常温避光保存不超过3天。

4.实验过程中如果需要暂停实验，可以停留在PBS溶液洗涤步骤，将切片放入PBS溶液中暂存，这种方式适用于在一周内完成的多色免疫荧光实验；如果需要长时间暂停实验，可以使用[#9]封片后放入4℃冰箱储存。

5.提供的[#1]根据说明书比例稀释后，按照抗原修复一次需要200mL，可以做10次抗原修复，请合理安排抗原修复的次数。

6.在实验过程中，为了保证试剂的充分反应和实验的可重复性，请不要在低于20℃的环境温度下进行实验操作。同时，避免切片所处溶液温度的快速升高或者降低，减少对切片的损伤。

7.请严格按照Protocol里面的时间孵育抗体和显色液，长时间的反应会增加非特异着色。

样本要求

石蜡切片要求使用黏附载玻片，并且保持组织完整、厚薄均匀、无褶皱、无刀痕，常规切片厚度为3~5μm，短时间可以常温保存，长时间应低温保存。