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华安生物重组兔单克隆抗体

一.重组兔单克隆抗体生产
重组兔单克隆抗体生产技术不同于传统的生产小鼠单克隆抗体的杂交瘤技术,它使用兔作为免疫动物,通过分离外周血单核细胞(PBMCs)或脾脏获得抗原特异性的单B细胞,利用分子生物学技术获得抗体序列信息后导入哺乳动物细胞中构建重组表达系统,生产出与兔原生单克隆抗体具有相同特异性和亲和力的重组抗体,再通过一系列筛选获得满足不同应用需求的重组兔单克隆抗体。此生产方法是无动物源性的,可以制备高特异性和高亲和力的单克隆抗体,用于科学研究、疾病诊断、药物研发等领域。
 
二.重组兔单克隆抗体优势

优势一:批次间一致性
重组兔单克隆抗体的生产是通过重组DNA技术转染哺乳动物细胞生产出来,可以避免传统单克隆抗体生产中因杂交瘤细胞中抗体DNA随着时间推移而发生遗传漂变所带来的不稳定性问题,不同批次间具有高度的一致性。图1为利用独立批次的重组兔单克隆抗体产生的一致性免疫印迹分析结果。图2为利用独立批次的重组兔单克隆抗体产生的一致性免疫组织化学分析结果。图3为独立批次的重组兔单克隆抗体产生的一致性流式细胞术分析结果。

 
图2 WB检测批次间一致性(ET1607-73):左右两张图分别使用不同批次Phospho-Akt1(Ser473)重组兔单抗检测 C6细胞经Calyculin A (100 nM) 处理 30 min后该蛋白水平变化,结果呈现极佳一致性 
图3 IHC检测批次间一致性(HA721146):左右两张图分别使用不同批次Myeloperoxidase重组兔单抗检测人脾组织中该蛋白定位情况,结果显示一致的细胞和亚细胞定位
图4 FC检测批次间一致性(ET1609-25):左右两张图分别使用不同批次TOMM20重组兔单抗检测HeLa细胞中该蛋白表达情况,结果呈现极佳一致性

优势二:抗体特异性
兔机体内环境可作为天然的B细胞反应库,产生多种多样的抗体,利用重组技术和多次筛选获得特异性更高的抗体,可以消除或降低非特异性结合造成的背景问题。  

图5 WB检测特异性(KD验证)(ET1601-18): C2C12细胞分别经对照siRNA(1泳道)和VCAM1 siRNA处理(2泳道)后,WB检测该蛋白水平变化,结果呈现特异性变化。
图6  IHC检测特异性( HA600082 ): 使用ALCAM重组兔单抗检测人子宫内膜组织中该蛋白的腺细胞膜定位特异且无背景。

优势三:抗体灵敏度
兔免疫系统的亲和力优化机制比小鼠和其他啮齿动物更有效,产生的抗体亲和力高。利用重组技术以及筛选可以得到亲和力更高的抗体,适用于检测低表达丰度靶标。
 
图7  WB检测灵敏度( ET1601-29 ):分别利用本公司ERK1/2重组兔单抗(1:5000,左图)和CST公司ERK1/2重组兔单抗(1:1000,右图)检测6种细胞样本中的ERK1/2蛋白情况。结果显示,在相同条件下,本公司ERK1/2重组兔单抗具有更高灵敏度。

 
 
图8  ICC检测蛋白的灵敏度( ET1609-25 ): 分别利用本公司TOMM20重组兔单抗(1:1000,左图)和CST公司TOMM20重组兔单抗 (1:400,右图)检测NIH/3T3细胞样本中TOMM20蛋白情况。结果显示,在相同条件下,本公司TOMM20重组兔单抗具有更高灵敏度。

其他优势:
可识别更多表位、可识别小鼠抗原、可以不依赖动物进行更便捷的生产,缩短生产周期,提高产量,保证产品持续供给。总之,重组兔单克隆抗体具有更高的特异性和灵敏度、更好的批次间一致性、更稳定高效的生产供给等优势,因此在科学研究和临床诊断中得到广泛应用。
 
 

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