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11-2019

组织切片免疫荧光(IF)

发布时间:2019年11月04日

组织切片免疫荧光(IF)操作流程

1. 组织切片60℃烤片溶蜡;

2. 二甲苯(I)脱蜡15min;二甲苯(II)脱蜡15min;

3. 无水乙醇(I)、无水乙醇(II)、95%乙醇洗涤,各1min;

4. 水冲洗3min;

5. 0.25%Triton X-100(PBS制)37℃(室温高于22℃则室温孵育)孵育20min

6. PBS清洗标本 3次各3 min

7. 封闭血清孵育20min

8. 一抗孵育4℃过夜或37℃ 1h。阴性对照最好用一抗来源血清,否则用PBS

9. PBS清洗标本 3次各3 min

10. 荧光二抗孵育37℃ 1h(室温高于22℃则室温孵育)

11. PBS清洗标本3次各3 min

12. 蒸馏水洗21 min

13. AEC水溶性封片剂封片,37℃或50℃烘干

14. 二甲苯浸润,中性树胶封片。

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