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09-2019

酶联免疫吸附试验(ELISA)

发布时间:2019年09月25日

ELISA检测基本流程:

1、包板:将包被缓冲液稀释的抗原50ul/孔加入酶标板中,4℃包被过夜,弃液。

2、封闭:将1% BSA以100ul/孔加入酶标板中,37℃封闭1h,弃液。

3、一抗:将梯度稀释的待检样品以50ul/孔加入酶标板中,用BSA作阴性对照,37℃孵育45min,弃液。

4、二抗:将稀释的HRP标记二抗以50ul/孔加入酶标板中,37℃孵育30min,弃液。

5、洗涤:将1×TBST140ul/孔加入酶标板中,洗板,重复3次。

6、显色:A液和B液1:1充分混合,以100ul/孔加入酶标板中,37℃孵育10min。

7、终止:将1M硫酸溶液以50ul/孔加入酶标板中,终止显色。

8、读板:用酶标仪在检测波长450nm,参比波长630nm的检测参数下读出相应OD值

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