
腹水纯化
服务简介:
本服务项目主要接收客户提供的抗血清、腹水或细胞上清纯化得到抗体,纯化方法主要为硫酸铵纯化、蛋白A / G纯化、抗原亲和纯化等,帮助客户解决各种抗体纯化问题。
选择指南:
抗体种类及类型 |
琼脂糖 |
兔IgG |
Protein A or Protein G |
小鼠IgG1 |
Protein G |
小鼠IgG2 |
Protein A or Protein G |
小鼠IgG3 |
Protein G |
羊IgG |
Protein G but binds weakly |
大鼠IgG |
Protein G but binds weakly |
豚鼠IgG |
Protein A |
狗IgG |
Protein A |
山羊IgG |
Protein G |
猪IgG |
Protein A |
实验流程:
A.倒入蛋白质A / G亲和柱
B.亲和层析制备抗血清或腹水
C.采用蛋白A / G琼脂糖进行亲和层析
1.制备缓冲液。
2.蛋白质琼脂糖或蛋白质G琼脂糖亲和柱的制备。
3.采用PBS平衡和洗涤蛋白A / G柱。
4.以每分钟约1-2 ml的流速填充柱子。
5.用10倍床体积的冰冷PBS洗涤色谱柱。
6.用于亲和层析的抗血清或腹水的制备。
7.除去澄清的抗血清。
8.稀释血清或腹水以及上清液。
9.将洗脱缓冲液应用于色谱柱。
10.用上样缓冲液重新平衡色谱柱。
11.合并阳性蛋白质。
12.在4°C下透析至预期的缓冲液即pH 7的PBS中。
13.如果不再进行运行,请用包含0.05-0.1%叠氮化钠的PBS洗涤色谱柱。用塞子或封口膜密封色谱柱,并在4°C下保存。
