您的当前位置: 首页 >促销与新闻

05-2020

新品| M13 Antibody (HRP)

发布时间:05/28/2020

前言
2018年10月诺贝尔化学奖的一半颁发给了美国科学家George P. Smith和英国科学家Gregory P. Winter, 两人获奖的原因是多肽和抗体的噬菌体展示技术。噬菌体展示技术在生物医药研发中有着十分广泛的应用,是生物新药研发的源头技术,M13噬菌体则被广泛地应用于噬菌体展示技术。M13的酶标抗体,是在噬菌体展示技术筛选结果ELISA检测中不可缺少的试剂。
M13噬菌体
M13噬菌体是一种丝状噬菌体,内有一个环状单链DNA分子,长6407个核苷酸,含DNA复制和噬菌体增殖所需的遗传信息。M13 DNA的复制起始位点定位在基因间隔区内。但是基因间隔区的有些核苷酸序列即使发生突变、缺失或插入外源DNA片段,也不会影响M13 DNA的复制,这为M13 DNA构建克隆载体提供了条件。

噬菌体结构
M13 噬菌体的生物学特性
M13 噬菌体颗粒是丝状的,只感染F+(含F质粒,能产生性菌毛)的大肠杆菌。感染宿主后通常不裂解宿主细胞,而是从感染的细胞中分泌出噬菌体颗粒,宿主细胞仍能继续生长和分裂。但生长水平比未感染组低。
噬菌体侵染细菌的过程
M13噬菌体载体
单链 DNA 的酶切和连接是比较困难的,因此 M13 噬菌体在用作载体时是利用其双链 RF DNA。RF DNA 很容易从感染细胞中纯化出来,可以象质粒一样进行操作,并可通过转化方法再次导入细胞。
在 M13 噬菌体基因组中绝大多数为必需基因,只有两个间隔区可用来插入外源 DNA(基因 / 和基因 / 之间)。基因  和基因  之间的 508bp 间隔区是主要的外源片段插入位点。在基因  和基因  之间的小间隔区也可用来插入外源片段,但是在操作过程中,需要获得感染细胞的菌落进行影印筛选,比利用可见的噬菌斑方法更慢更麻烦。基因  也可用来克隆外源片段。
噬菌体载体结构

M13噬菌体展示系统
M13噬菌体属于单链环状DNA病毒,其基因组为6.4 kb,编码10种蛋白,其中5种为结构蛋白,包括主要衣壳蛋白的P 和次要衣壳的p p P P 。其中,p P 是噬菌体展示中最常用的两种蛋白,构建了p P 展示系统。p 蛋白分子量为42 kDa,分布在噬菌体颗粒的一端。一般一个噬菌体有3-5个拷贝的p 蛋白,可在N端的柔性连接区插入外源蛋白或者多肽。p 系统的主要优点是对展示的外源蛋白大小无严格的要求,该系统可以用来展示分子量较大的蛋白。P 蛋白的分子量为5.2 kDa,主要分布在噬菌体颗粒的两侧。由于该蛋白的分子量很小,只适合用来展示外源短肽。外源肽段的太大会影响病毒包装,不能形成有功能的噬菌体。但由于pⅢ蛋白拷贝数较多,该系统比较适合用来筛选低亲和力的配体。
M13酶标抗体

华安生物专注于抗体的研发与生产,拥有噬菌体展示技术抗体开发平台,深刻了解M13酶标抗体对噬菌体展示技术的重要性。我们也一直在研发更加优秀的酶标抗体,现在就让我们来了解华安生物最新M13酶标抗体

M8.png


实验验证:
Fig1: Elisa Test of M13 antibody (HRP)(EM1902-19) Binding to M13 Phage.
Samples were blocked with 1% BSA for 1 hours at 37°C and incubated with the primary antibody (EM1902-19, 1/10000) for 1 hours at 25°C. The M13 antibody was repeatedly frozen and thawed for 4 times at -80°C, 4°C, 37°C,.
Fig1: Elisa Test of M13 antibody (HRP) (EM1902-18) Binding to M13 Phage.
Samples were blocked with 1% BSA for 1 hours at 37°C and incubated with the primary antibody (EM1902-18, 1/10000) for 1 hours at 25°C. The M13 antibody was repeatedly frozen and thawed for 4 times at -80°C, 4°C, 37°C,.

返回